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人主要組織相容性復合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒說明書

點擊次數(shù):1025 發(fā)布時間:2021/5/18
提 供 商: 上海撫生實業(yè)有限公司 資料大?。?/td>
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                           人主要組織相容性復合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒說明書

1、試劑盒簡介貨為了適應(yīng)人主要組織相容性復合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 國際標準中規(guī)定的引物序列,經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化,開發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。2、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表 1:s

                                                    表 1:試劑盒組成(50test/盒)

組成成分

體積

樣品 DNA 提  1

樣品 DNA 提  2

5ml×1 管

500µl×1 管

核酸擴增試劑: DEPC 水

BP PCR 反應(yīng)液

Taq 酶(5U/ul) 陰性對照

BP 陽性對照

5ml×1 管

750µl×1 管

40µl×1 管

1ml×1 管

1ml×1 管

人主要組織相容性復合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
 
標記物:血清 血漿 組織勻漿等
 
應(yīng)用:僅用科研實驗檢測定量,定性檢
 
檢測方法:夾心法
 
技術(shù)要求:全程按說明書步驟檢測,操作規(guī)范,專業(yè),儀器設(shè)備齊全。

規(guī)格:48t/96t 

性狀:液體 

運輸方式:快遞發(fā)貨 

有效期:6個月品

特點:靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。

使用范圍:此產(chǎn)品供科研實驗使用,不得用于---。

用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。

人主要組織相容性復合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒注意事項:

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

3.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

8.本試劑不同批號組分不得混用。

9.不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 

每個樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2。

                                    表 2 每個樣品測試反應(yīng)體系配制表

試劑

PCR 反應(yīng)液

Taq 酶

合計

用量

14.5 μL

0.5μL

15μL

人主要組織相容性復合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒試劑盒組成及試劑配制:
1.  酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 
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